It is well established that herpesviruses encode numerous microRNAs (miRNAs) and that these virally encoded small RNAs play multiple roles in infection. The present study was undertaken to determine how co-infection of a pathogenic MDV serotype one (MDV1) strain (MD5) and a vaccine strain (herpesvirus of turkeys [HVT]) alters viral miRNA expression in vivo. We first used small RNA deep sequencing to identify MDV1-encoded miRNAs that are expressed in tumorigenic spleens of MDV1-infected birds. The expression patterns of these miRNAs were then further assessed at an early time point (7 days postinfection [dpi]) and a late time point (42 dpi) in birds with and without HVT vaccination using real-time PCR (RT-PCR). Additionally, the effect of MDV1 co-infection on HVT-encoded miRNAs was determined using RT-PCR. A diverse population of miRNAs was expressed in MDV-induced tumorigenic spleens at 42 dpi, with 18 of the 26 known mature miRNAs represented. Of these, both mdv1-miR-M4-5p and mdv1-miR-M2-3p were the most highly expressed miRNAs. RT-PCR analysis further revealed that nine MDV miRNAs were differentially expressed between 7 dpi and 42 dpi infected spleens. At 7 dpi, three miRNAs were differentially expressed between the spleens of birds co-infected with HVT and MD5 compared with birds singly infected with MD5, whereas at 42 dpi, nine miRNAs were differentially expressed. At 7 dpi, the expression of seven HVT-encoded miRNAs was affected in the spleens of co-infected birds compared with birds only receiving the HVT vaccine. At 42 dpi, six HVT-encoded miRNAs were differentially expressed between the two groups. Target prediction analysis suggests that these differentially expressed viral miRNAs are involved in regulating several cellular processes, including cell proliferation and the adaptive immune response.

La interacción entre el virus de Marek y el herpesvirus de los pavos afecta a la expresión de micro ARN viral.

Está bien establecido que los herpesvirus codifican numerosos micro ARN (con las siglas en inglés miRNAs) y que estas pequeñas moléculas de ARN codificadas viralmente juegan múltiples papeles en la infección. El presente estudio se realizó para determinar como la co-infección entre una cepa patógena (MD5) del virus de Marek serotipo 1 (MDV1) y una cepa vacunal (herpesvirus de los pavos [HVT]) altera la expresión de los genes micro ARN viral in vivo. Se utilizó por primera vez la secuenciación profunda de moléculas pequeñas de ARN para identificar micro ARN codificado por el virus de Marek serotipo 1 que se expresan en los bazos con tumores en las aves infectadas por el virus de Marek 1. Los patrones de expresión de micro ARN fueron valorados mediante PCR en tiempo real (RT-PCR), de manera temprana (7 días después de la infección) y tardíamente (42 días después de la infección) en las aves con y sin vacunación con el herpesvirus de los pavos. Además se determinó el efecto de la co-infección con el virus de Marek serotipo 1 sobre el micro ARN codificado por el herpesvirus de los pavos mediante PCR en tiempo real. Se expresó una población diversa de micro ARN en los bazos con tumores inducidos por el virus de Marek a los 42 días después de la infección, con 18 micro ARNs maduros representados de los 26. De éstos, tanto el mdv1-miR-M4-5p y el mdv1-miR-M2-3p fueron los micro ARN más expresados. El análisis por PCR en tiempo real reveló que nueve micro ARN del virus de Marek se expresan diferencialmente entre 7 y 42 días después de la infección en los bazos infectados. A los siete días después de la infección, tres micro ARN fueron expresados diferencialmente en los bazos de las aves co-infectadas con el herpesvirus de los pavos y la cepa MD5 en comparación con las aves infectadas con el virus MD5 por separado