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1 June 2012 Selection of a Recombinant Marek's Disease Virus In Vivo Through Expression of the Marek's EcoRI-Q (Meq)–Encoded Oncoprotein: Characterization of an rMd5-Based Mutant Expressing the Meq of Strain RB-1B
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Abstract

Marek's disease (MD) is a highly contagious viral disease of chickens (Gallus gallus domesticus) caused by MD virus (MDV), characterized by paralysis, neurologic signs, and the rapid onset of T-cell lymphomas. MDV-induced T-cell transformation requires a basic leucine zipper protein called Marek's EcoRI-Q–encoded protein (Meq). We have identified mutations in the coding sequence of Meq that correlated with virus pathotype (virulent, very virulent, and very virulent plus). The aim of this study was to determine whether recombinant viruses could be isolated based on Meq expression through in vivo selection. Chicken embryo fibroblasts (CEFs) were cotransfected with an rMd5 strain-based Meq deletion virus (rMd5ΔMeq) and meq loci from strains representing different pathotypes of MDV. Transfected CEFs were inoculated into chickens in two independent studies. We were able to isolate a single recombinant virus, rMDV-1137, in a contact-exposed chicken. rMDV-1137 had recombined two copies of the meq gene of RB-1B and was found to have pathogenicity similar to both RB-1B and rMd5 parental strains. We found the RB-1B– and rMd5-induced lymphomas showed differences in composition and that rMDV-1137–induced lymphomas were intermediate in their composition. We were able to establish cell lines from both RB-1B– (MDCC-UD35, -UD37) and rMDV-1137 (MDCC-UD36, -UD38)–induced, but not rMd5-induced, lymphomas. To date, no rMd5- or parent Md5-transformed T-cell lines have been reported. Our results suggest that 1) a recombinant MDV can be selected on the basis of oncogenicity; 2) changes in Meq sequence seem to affect tumor composition and the ability to establish cell lines; and 3) in addition to meq, other genomic loci affect MDV pathogenicity and oncogenicity.

Selección de un virus de la enfermedad de Marek recombinante in vivo a través de la expresión de la oncoproteína codificada por el gene EcoRI-Q (Meq) del virus de Marek: Caracterización de una mutante basada en el virus rMd5 que expresaba la proteína Meq de la cepa RB-1B.

La enfermedad de Marek (MD) es una enfermedad viral muy contagiosa de los pollos (Gallus gallus domesticus) causada por el virus de la enfermedad de Marek, que se caracteriza por parálisis, signos neurológicos, y la rápida aparición de los linfomas de células T. La transformación de células T inducida por el virus de Marek, requiere de proteína con una cremallera básica de leucina llamada proteína codificada por el segmento de Marek EcoRI-Q (Meq). Se han identificado mutaciones en la secuencia de codificación del gene Meq que se correlacionaron con el patotipo del virus (virulento, muy virulento, y muy virulento plus). El objetivo de este estudio fue determinar si los virus recombinantes pueden ser aislados con base en la expresión de Meq a través de selección in vivo. Se cotransfectaron fibroblastos de embrión de pollo con un virus basado en la cepa rMd5 que presentaba la deleción de Meq (rMd5ΔMeq) y con el loci de meq de cepas que representan a diferentes patotipos del virus de Marek. Los fibroblastos transfectados fueron inoculados en pollos en dos estudios independientes. Fue posible aislar un solo virus recombinante, rMDV-1137, en un pollo expuesto por contacto. El virus rMDV-1137 presentó dos copias recombinantes del gene meq del virus RB-1B y se encontró que tienen patogenicidad similar a ambos virus progenitores, RB-1B y rMd5. Se observó que los linfomas inducidos por RB-1B y por rMd5 mostraron diferencias en la composición y que los linfomas inducidos por rMDV-1137 fueron intermedios en su composición. Se pudieron establecer líneas celulares de ambos linfomas inducidos por los virus RB-1B-(MDCC-UD35, -UD37) y por el virus rMDV 1137 (MDCC-UD36, -UD38

American Association of Avian Pathologists
Pankaj Kumar, Huimin Dong, Dawn Lenihan, Syamsundar Gaddamanugu, Upendra Katneni, Shireen Shaikh, Phaedra Tavlarides-Hontz, Sanjay M. Reddy, Wachen Peters, and Mark S. Parcells "Selection of a Recombinant Marek's Disease Virus In Vivo Through Expression of the Marek's EcoRI-Q (Meq)–Encoded Oncoprotein: Characterization of an rMd5-Based Mutant Expressing the Meq of Strain RB-1B," Avian Diseases 56(2), 328-340, (1 June 2012). https://doi.org/10.1637/9955-100611-Reg.1
Received: 7 October 2011; Accepted: 1 December 2011; Published: 1 June 2012
JOURNAL ARTICLE
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