Monitoring programs for highly dangerous avian diseases in the Russian Federation from 2001 to 2009 detected 77 samples that were PCR positive for avian paramyxovirus serotype-1 (APMV-1) from sick or dead feral and domestic pigeons. Nucleotide sequences of the fusion (F) gene, including a nucleotide sequence encoding the F protein cleavage site, were determined for these isolates. All of the studied isolates possessed virulent F₀ protein cleavage sites (¹¹²KRKKRF¹¹⁷, ¹¹²RRQKRF¹¹⁷, or ¹¹²KRQKRF¹¹⁷). Intracerebral pathogenicity index (ICPI) values determined for seven of the isolates exceeded the value of 0.7 (the range from 0.8 to 1.41). Based on partial genome sequencing and phylogenetic analysis, the isolates were assigned to two individual sublineages within class II genotype VIb. It was determined that most of these Newcastle disease virus isolates (70/77) recovered from the pigeons belonged to a relatively poorly studied sublineage VIb/2. The complete nucleotide sequence of the genome for the Pigeon/Russia/Vladimir/687/05 isolate of sublineage VIb/2 was determined.

Características de los aislamientos de paramixovirus de palomas serotipo 1 (PPMV-1) de la Federación de Rusia desde el año 2001 hasta el 2009.

Mediante los programas de vigilancia para las enfermedades aviares altamente peligrosas en la Federación de Rusia desde el año 2001 hasta el 2009, se detectaron 77 muestras positivas por PCR para paramixovirus aviar del serotipo 1 (APMV-1) de palomas silvestres y domésticas que estaban enfermas o muertas. Para todos los aislamientos, se determinaron las secuencias de nucleótidos del gene de fusión (F), incluyendo una secuencia de nucleótidos que codifica el sitio de disociación de la proteína F. Todos los aislamientos estudiados poseían en la proteína F₀, sitios de disociación característicos de cepas virulentas (¹¹²KRKKRF¹¹⁷, ¹¹²RRQKRF¹¹⁷ o ¹¹²KRQKRF¹¹⁷). Se determinó el índice de patogenicidad intracerebral (ICPI) de siete aislamientos los cuales excedieron el valor de 0.7 (rango de 0.8 a 1.41). Con base en la secuenciación parcial del genoma y en el análisis filogenético, los aislamientos fueron asignados a dos sublinajes individuales dentro de la clase II genotipo VIb. Se determinó que la mayor parte de estas cepas del virus enfermedad de Newcastle (70/77) obtenidas de las palomas pertenecían a un sublinaje VIb/2 relativamente poco estudiado. Se determinó la secuencia completa de nucleótidos del genoma del aislamiento Paloma/Rusia/Vladimir/687/05 de sublinaje VIb/2.

Experimental infections of Newcastle disease virus (NDV) strains of different avian origin and different virulence in mallard (Anas platyrhynchos) ducklings were undertaken to evaluate infectivity and pathogenicity of NDV for ducks and the potential role of ducks in the epidemiology of Newcastle disease (ND). Ducklings were experimentally infected with seven NDV strains, and their clinical sign, weight gain, antibody response, virus shedding, and virus distribution in tissues were investigated. The duck origin virulent strain duck/Jiangsu/JSD0812/2008 (JSD0812) and the Chinese standard virulent strain F48E8 were highly pathogenic for ducklings. They caused high morbidity and mortality, and they distributed extensively in various tissues of infected ducklings. Other strains, including pigeon origin virulent strain pigeon/Jiangsu/JSP0204/2002 (JSP0204), chicken origin virulent strain chicken/Jiangsu/JSC0804/2008 (JSC0804), goose origin virulent goose/Jiangsu/JSG0210/2002 (JSG0210), and vaccine strains Mukteswar and LaSota had no pathogenicity to ducklings. They produced neither clinical signs of the disease nor adverse effect on growth of infected ducklings, and they persisted in duck bodies for only a short period. Virus shedding was detectable in all infected ducklings, but its period and route varied with the virulence of NDV strains. The results suggest that NDV with high pathogenicity in ducks may arise from the evolution within its corresponding host, further confirming that the ducks play an important role in the epidemiology of ND.

Infectividad y patogenicidad de cepas del virus de la enfermedad de Newcastle de diferente origen aviar y su virulencia para patitos de collar.

Se llevaron a cabo infecciones experimentales del virus de la enfermedad de Newcastle con cepas de diferente origen aviar y con diferencias en su virulencia para patitos de collar (Anas platyrhynchos). Se evaluó la infectividad y la patogenicidad del virus de Newcastle en patos y el posible papel de estas aves en la epidemiología de la enfermedad de Newcastle (ND). Se infectaron experimentalmente patitos con siete cepas del virus de Newcastle y se observaron los signos clínicos, el aumento de peso, la respuesta de anticuerpos, la eliminación del virus, y la distribución del virus en los tejidos. La cepa virulenta originada en patos duck/Jiangsu/JSD0812/2008 (JSD0812) y la cepa virulenta estándar de China fueron altamente patógenas para los patitos. Estas cepas causaron morbilidad y mortalidad altas, y se distribuyeron ampliamente en varios tejidos de los patitos infectados. Otras cepas, incluyendo una cepa virulenta con origen en palomas pigeon/Jiangsu/JSP0204/2002 (JSP0204), una cepa virulenta con origen en pollos chicken/Jiangsu/JSC0804/2008 (JSC0804), una cepa virulenta con origen en gansos goose/Jiangsu/JSG0210/2002 (JSG0210), y las cepas vacunales Mukteswar y LaSota no mostraron patogenicidad para los patitos. Estas cepas no indujeron signos clínicos de la enfermedad ni efectos adversos sobre el crecimiento de patitos infectados y persistieron en los órganos de los patitos sólo por un corto período. La propagación del virus era detectable en todos los patitos infectados, pero su periodo y ruta y variaba con la virulencia de las cepas de Newcastle. Los resultados sugieren que virus de Newcastle con alta patogenicidad en los patos pueden surgir de la evolución dentro de su hospedero correspondiente, además de confirmar que los patos juegan un papel importante en la epidemiología de la enfermedad de Newcastle.

The presence of infectious chicken anemia virus (CAV) was detected in a previous study by nested-PCR as a contaminant in seven commercial vaccines, produced in the 1990s by three different manufacturers, prepared against the most relevant virus etiologies. In order to phylogenetically characterize the genome and compare it to CAV isolates from Brazil and other parts of the world, sequences of approximately 675 bp of the gene encoding the hypervariable region of VP1 protein of three CAV vaccine contaminant strains were studied. The CAV genome in contaminated vaccines showed high similarity (>98.9%) with the Brazilian BR91/99 and Argentinian ArgA001028 (>99%) strains. However, the comparison with the Cuxhaven-1 vaccine strain showed a lower identity of between 96.8% and 97.7%, and comparing it with the CAV26P4 vaccine strain showed an identity between 97.2% and 98.2%; both are available in Brazil. Such differences might be relevant for the highly conserved CAV genome. CAV contaminants were positioned in the same genetic group (clusters) with the Brazilian strain BR91/99 and Argentinian strain ArgA001028. Results indicated that the contamination of live vaccines by CAV may have influenced CAV epidemiology in the Brazilian and Argentinian poultry industry.

Caracterización molecular de los virus de la anemia infecciosa del pollo detectados como contaminantes en vacunas comerciales producidas en la década de los noventas.

En un estudio previo, se detectó mediante un método de PCR anidado la presencia del virus de la anemia infecciosa del pollo (CAV) como contaminantes en siete vacunas comerciales contra etiologías variadas, que fueron producidas en los años noventas por tres laboratorios diferentes. Con el objetivo de caracterizar filogenéticamente el genoma y compararlo con aislamientos del virus de la anemia de Brasil y de otras partes del mundo, se estudiaron las secuencias de aproximadamente 675 pares de bases que codificaban para la región hipervariable de la proteína VP1 de tres cepas del virus de la anemia que fueron contaminantes de vacunas. El genoma del virus de la anemia que se encontró en las vacunas contaminadas mostro una similitud alta (>98.9%), con la cepa brasileña BR91/99 y con la estirpe argentina ArgA001028 (>99%). Sin embargo, la comparación con la cepa vacunal Cuxhaven-1, mostró una similitud de entre 96.8 a 97.7% y de 97.2 a 98.2% con la estirpe vacunal CAV26P4, ambas cepas son usadas en Brasil para producir vacunas comerciales contra el virus de la anemia. Estas diferencias pueden ser relevantes debido a que el genoma del virus de la anemia infecciosa es altamente conservado. Los virus contaminantes de la anemia infecciosa se agruparon en el mismo grupo genético (clúster) con la cepa brasileña BR91/99 y de Argentina ArgA001028. Estos resultados indican que la contaminación de las vacunas vivas con el virus de la anemia infecciosa pudo haber influenciado la epidemiología del virus en la industria avícola de Brasil y Argentina.

While real-time–polymerase chain reaction (RT PCR) has been used as a rapid test for detection of Salmonella Enteritidis in recent years, little research has been done to assess the feasibility of pooling poultry environmental samples with a Salmonella Enteritidis–specific RT PCR assay. Therefore the objective of this study was to compare RT PCR Salmonella Enteritidis detection in individual and pooled (in groups of two, three, and four) poultry environmental drag swab samples to traditional cultural methods. The drag swabs were collected from poultry facilities previously confirmed positive for Salmonella Enteritidis and were cultured according to National Poultry Improvement Plan guidelines. Initial, Salmonella Enteritidis–specific RT PCR assay threshold cycle cutoff values of ≤36, ≤30, and ≤28 were evaluated in comparison to culture. The average limit of detection of the RT PCR assay was 2.4 × 10³ colony-forming units (CFUs)/ml, which corresponded to an average threshold cycle value of 36.6. Before enrichment, samples inoculated with concentrations from 10² to 10⁵ CFUs/ml were detected by RT PCR, while after enrichment, samples inoculated from 10⁰ to 10⁵ CFUs/ml were detected by RT PCR. Threshold cycle cutoff values were used in the subsequent field trial from which Salmonella Enteritidis was cultured in 7 of 208 environmental samples (3.4%). Individual samples were 99.0%, 100%, and 100% in agreement with the RT PCR at threshold cycle (C_t) cutoff values of ≤36, ≤30, and ≤28 respectively. The agreement for pooled samples also followed the same trend with highest agreement at C_t ≤ 28 (pool of 2  =  100.0%, pool of 3  =  100.0%, pool of 4  =  100.0%), midrange agreement at C_t ≤ 30 (pool of 2  =  99.0%, pool of 3  =  100.0%, pool of 4  =  100.0%), and lowest agreement at C_t ≤ 36 (pool of 2  =  98.1%, pool of 3  =  97.1%, pool of 4  =  98.1%). In conclusion, regardless of the level of pooling after tetrathionate enrichment, sensitivity was very good, and results would be comparable to what would have been found with individual culture or individual RT PCR at C_t ≤ 36.

Detección de Salmonella Enteritidis en muestras ambientales avícolas agrupadas, utilizando un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real específico de serotipo.

No obstante que en los años recientes el método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) ha sido utilizado como una prueba rápida para la detección de Salmonella Enteritidis, se ha realizado poca investigación para evaluar la viabilidad de agrupar las muestras ambientales avícolas para realizar un ensayo específico de RT-PCR para Salmonella Enteritidis. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue comparar el método de RT- PCR para la detección de Salmonella Enteritidis con muestras de hisopos de arrastre de instalaciones avícolas individuales y agrupadas (en grupos de dos, tres o cuatro hisopos) con los métodos de cultivo tradicionales. Los hisopos se obtuvieron de instalaciones avícolas que fueron previamente confirmadas positivas para Salmonella Enteritidis y se cultivaron de acuerdo con las especificaciones del Plan Nacional para el Mejoramiento Avícola. Se evaluaron los valores iniciales de corte de los ciclos umbrales de ≤36, ≤30, y 28 ≤ del

Fowl typhoid (FT), a systemic disease that results in septicemia in poultry, is caused by Salmonella enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG). Mortality and morbidity rates from FT can reach up to 80%. Attenuated live Salmonella vaccine candidates have received considerable attention because they confer solid immunity, and they can produce systemic and mucosal immunity in the gut when administered orally. In the present study, five metabolic drift (MD) mutants with a single- (designated SG-Rif1, SG-Sm6) or double-attenuating marker (designated SG-Rif1-Sm4, SG-Sm6-Rif10, and SG-Rif1-Sm10) were isolated. The relative colony sizes to wild-type strain after 24 hr at 37 C incubation were 50%, 40%, 30%, 30%, and 20%, respectively. The probability of a back mutation can almost be excluded because the reduced colony sizes were stable after at least 50 passages on culture media. The safety and immunogenicity were evaluated in susceptible 1-day-old commercial layer chickens. After oral administration of 10⁸ colony-forming units (CFU), all developed MD mutants proved to be safe and did not cause death of any infected birds during 15 days postvaccination, whereas chickens receiving 10⁶ CFU SG wild-type strain showed a high mortality rate (40%). Vaccination of commercial layer chicks with SG-Rif1, SG-Sm6, SG-Rif1-Sm4, and SG-Sm6-Rif10 MD mutants could protect chickens against challenge by homologous wild-type strain; however, SG-Rif1-Sm10 could not protect against challenge, indicating hyperattenuation. In conclusion, vaccination with SG MD mutant vaccine appears to be safe and offers protection against FT in chickens.

Seguridad y eficacia de una vacuna variante metabólica de Salmonella Gallinarum viva atenuada contra la tifoidea aviar.

La tifoidea aviar, una enfermedad sistémica que produce septicemia en aves de corral, es causada por Salmonella enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG). Las tasas de mortalidad y morbilidad de la tifoidea aviar pueden alcanzar hasta el 80%. Candidatos de vacunas vivas atenuadas de Salmonella han recibido una atención considerable porque confieren inmunidad sólida, y pueden producir una inmunidad sistémica y en la mucosa intestinal cuando se administran por vía oral. En el presente estudio, se aislaron cinco mutantes metabólicas con un solo marcador (designadas SG-Rif1 y SG-Sm6) o con marcador de atenuación doble (designadas SG-Rif1-Sm4, SG-Sm6-Rif10 y Rif1 SG–Sm10). Los tamaños de colonia relativos a la cepa de tipo silvestre después de 24 h con incubación a 37 C fueron de 50%, 40%, 30%, 30%, y 20%, respectivamente. La probabilidad de una mutación en reversa pudo excluirse porque las colonias con tamaños reducidos fueron estables después de al menos 50 pases en medios de cultivo. La seguridad y la inmunogenicidad se evaluó en aves de postura comerciales susceptibles de un día de edad. Después de la administración oral de 10⁸ unidades formadoras de colonias (UFC), todas las mutantes metabólicas MD desarrolladas demostraron ser seguras y no causaron la muerte de las aves infectadas dentro de los quince días después de la vacunación, por su parte, las aves que recibieron 10⁶ UFC de S. Gallinarum de tipo silvestre mostraron una alta tasa de mortalidad (40%). La vacunación de ponedoras comerciales con las mutantes metabólicas SG-Rif1, SG-Sm6, SG-Rif1 Sm4, y SG-SM6-Rif10 pudo proteger a los pollos contra el desafío con cepas silvestres homólogas, sin embargo, la vacuna SG-Rif1-SM10 no pudo proteger contra el desafío, indicando hiperatenuación. En conclusión, la vacunación con vacunas mutantes metabólicas de S. Gallinarum parece ser segura y ofrece protecc

Tracheas from chickens infected both in the field and experimentally with lentogenic Newcastle disease virus (also known as avian paramyxovirus-1 [APMV-1] and referred to here as “lentogenic NDV”) were examined histopathologically to score degree of pathologic changes and by immunohistochemistry to determine presence of viral protein. In the field cases there was often a striking lack of correlation between severity of tracheal lesions and amount of immunohistochemical signal for APMV-1 protein. Experimental cases had minimal pathologic changes and also minimal immunohistochemical signal. Positive cells were often associated with surface deciliation. It may be that lentogenic NDV has only a minor role as a respiratory pathogen, merely compromising the mucosa to allow other respiratory pathogens to infect and worsen the clinical and pathologic presentation.

Presencia de paramixovirus aviar-1 mediante inmunohistoquímica en tráqueas de pollos infectados de manera experimental y natural.

Las tráqueas de pollos infectados en el campo o de manera experimental con el virus lentogénico de la enfermedad de Newcastle (también conocido como paramixovirus aviar-1 [APMV-1] y referido como “NDV lentogénico”) fueron examinadas histopatológicamente para determinar las calificaciones de los cambios patológicos y por inmunohistoquímica para determinar la presencia de la proteína viral. En los casos de campo, a menudo se observó a una sorprendente falta de correlación entre la severidad de las lesiones traqueales y la cantidad de la señal por inmunohistoquímica para la proteína del APMV-1. Los casos experimentales mostraron un mínimo de cambios patológicos y la señal de inmunohistoquímica también fue mínima. Las células positivas se asociaron a menudo con pérdida de los cilios en la superficie. Puede ser que el virus lentogénico de Newcastle tiene un papel menor como un patógeno respiratorio, simplemente por comprometer la mucosa y permitir que otros patógenos respiratorios puedan infectar y agravar el cuadro clínico y patológico.

Nucleotide sequences that encode the pVP2 proteins from a variant infectious bursal disease virus (IBDV) strain designated USA08MD34p and a classic IBDV strain designated Mo195 were produced with the use of reverse-transcriptase–polymerase chain reaction (RT-PCR) and cloned into a pGEM-T Easy vector. A nucleotide sequence that encodes the VP3 protein was also produced from the USA08MD34p viral genome with the use of RT-PCR and cloned into a pGEM-T Easy vector. The VP3 and pVP2 clones were inserted into the pVL1393 baculovirus transfer vector and sequenced to confirm their orientation to the promoter and to ensure they contained uninterrupted open reading frames. Recombinant baculoviruses were constructed by transfection in Sf9 cells. Three recombinant baculoviruses were produced and contained the USA08MD34p-VP3, USA08MD34p-pVP2, or Mo195-pVP2 genomic sequences. Virus-like particles (VLPs) were observed with the use of transmission electron microscopy when the USA08MD34p-VP3 baculovirus was co-inoculated into Sf9 cells with either of the pVP2 constructs. VLPs were also observed when the USA08MD34p-pVP2 and Mo195-pVP2 were coexpressed with USA08MD34p-VP3. These multivalent VLPs contained both classic and variant pVP2 molecules. Stability tests demonstrated the VLPs were stable at 4 and 24 C for 8 wk. The USA08MD34p, Mo195, and multivalent VLPs were used to vaccinate chickens. They induced an IBDV-specific antibody response that was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and virus-neutralizing antibodies were detected in vitro. Chickens vaccinated with the multivalent VLPs were protected from a virulent variant IBDV strain (V1) and a virulent classic IBDV strain (STC). The results indicate the multivalent VLPs maintained the antigenic integrity of the variant and classic viruses and have the potential to serve as a multivalent vaccine for use in breeder-flock vaccination programs.

Protección conferida por una vacuna multivalente elaborada con partículas similares a virus contra cepas clásicas y variantes de la enfermedad infecciosa de la bolsa.

Las secuencias de nucleótidos que codifican las proteínas pVP2 de una cepa variante de virus de la enfermedad infecciosa bursal (IBDV) designada USA08MD34p y una cepa clásica designada Mo195 fueron producidas mediante transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) y se clonaron en el vector pGEM -T Easy vector. También se produjo una secuencia de nucleótidos que codificaba para la proteína VP3 a partir del genoma viral de la cepa USA08MD34p mediante RT-PCR y se clonó en el vector pGEM-T Easy. Los clones VP3 y pVP2 fueron insertados en el vector de transferencia baculovirus pVL1393 y fueron secuenciados para confirmar su orientación con el promotor y para asegurar que contenía marcos de lectura continua ininterrumpidos. Los baculovirus recombinantes fueron construidos por la transfección en células Sf9. Se produjeron tres baculovirus y contenían las secuencias genómicas USA08MD34p-VP3, USA08MD34p-pVP2, o Mo195-pVP2. Con el uso de microscopía electrónica de transmisión se observaron virus semejantes a partículas cuando el baculovirus USA08MD34p-VP3 fue co-inoculado en células Sf9 con cualquiera de los constructos de pVP2. También se observaron partículas semejantes a virus cuando los vectores USA08MD34p-pVP2 y Mo195-pVP2-se fueron co-expresados con el vector USA08MD34p-VP3. Estas partículas semejantes a virus polivalentes contenían moléculas de pVP2 tanto clásicas como variantes. Las pruebas de estabilidad demostraron que las partículas semejantes a virus eran estables entre 4 y 24 C, durante 8 semanas. Los vectores USA08MD34p, Mo195 y las moléculas semejantes a virus polivalentes se utilizaron para vacunar pollos. Se indujo una respuesta de anticuerpos específico contra el virus de Gumboro que fue detectada por el ensayo de inmunoabsorción con enzimas ligadas (ELISA), y se detectaron a

Between July 2007 and December 2011, 2660 environmental drag swab samples were collected in total from California layer flocks on behalf of the California Egg Quality Assurance Program (CEQAP), the egg safety rule (21 CFR Parts 16 and 118) of the Food and Drug Administration (FDA), or both. The samples were processed by the California Animal Health and Food Safety Lab, and positive or negative results for Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE) were recorded. This study retrospectively compares the differences between the FDA and CEQAP programs with respect to their SE environmental sampling surveillance results. To accomplish this comparison, two different CEQAP (new and old) data sets representing different SE environmental surveillance approaches in the life of the flock were compared against each other and against the FDA's SE environmental testing plan. Significant differences were noted between the CEQAP and FDA programs with respect to the prevalence of SE in the farm environment. Analyses of the prevalence of SE at different stages in the flock's life cycle (chick papers, preproduction, midproduction, postmolt, and premarket) found the highest prevalence of SE in premarket (11.9%), followed by postmolt (3.5%) and midproduction (3.4%), and there was a tie between chick papers and preproduction (2.1%). To assess the main effects of the presence of SE in the farm environment, backwards binary logistic regression was used. Of six independent variables examined (age of flock, year, season, owner, CEQAP membership, and analysis of pooled samples vs.. individual swabs), only age of flock, owner, and year were determined to be significant factors in the final model. Although CEQAP membership and pooling vs. individuals swabs were not included in the final model, Pearson chi-square tests did show significantly higher odds of SE for non-CEQAP member farms and higher odds of SE in pooled samples vs.. individual swabs.

Vigilancia de Salmonella Enteritidis en casetas de aves de postura: Comparación retrospectiva de la reglamentación de la Administración de Alimentos y Medicamentos en la seguridad del huevo (2010–2011) y del Programa de Aseguramiento de la Calidad del Huevo en California (2007–2011).

Entre julio del 2007 y diciembre del 2011, se recolectaron 2660 muestras de hisopos de arrastre ambientales de parvadas completas de gallinas ponedoras de California bajo el Programa de Aseguramiento de la Calidad del Huevo en California (con las siglas en inglés CEQAP), bajo las reglamentaciones en seguridad del huevo (Código de Regulaciones Federales número 21, partes 16 y 118) de la Administración de Alimentos y Medicamentos (con las siglas en inglés FDA), o bajo ambos. Las muestras fueron procesadas en el Laboratorio de Salud Animal y Seguridad Alimentaria de California y se registraron los resultados positivos o negativos para Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE). Este estudio retrospectivo comparó las diferencias entre los programas de la FDA y del CEQAP con respecto a sus resultados de muestreos ambientales de vigilancia. Para llevar a cabo esta comparación, dos conjuntos diferentes de datos del CEQAP (nuevos y antiguos) que representaban diferentes enfoques de muestreos de vigilancia ambiental para Salmonella enterica serovar Enteritidis durante toda la vida de la parvada se compararon entre sí y con el plan de muestreo ambiental para S. enterica serovar Enteritidis de la FDA. Se observaron diferencias significativas entre los programas de la CEQAP y de la FDA con respecto a la prevalencia de esta bacteria en el ambiente de la granja. Mediante los análisis de la prevalencia para S. enterica serovar Enteritidis en las diferentes

A population of infectious bursal disease virus (IBDV) in northeast Ohio that appears to be geographically restricted was identified. Thirteen broiler farms containing a total of 36 houses were examined for the presence of IBDV. Twenty-four of the 36 houses were positive for IBDV, and of those viruses, 15 viruses from six different broiler farms formed a unique phylogenetic group. Nucleotide sequence analysis identified glutamic acid (E) at position 253 in all 15 viruses. Only one other virus in the GenBank database contained this mutation, and it was also from northeast Ohio. All 15 viruses from this study and the one identified in GenBank also had a unique VP1 sequence. The amino acids located at position 253 in VP2 are typically histidine (attenuated viruses) and glutamine (pathogenic viruses). Because amino acid 253 has been linked to pathogenicity in IBDV, two viruses from the E253 population were selected for pathogenicity studies. They were observed to be pathogenic in 4-wk-old specific-pathogen-free layer chicks. When these two viruses were used to challenge broilers from the parent flock that supplies the birds to all 13 broiler farms examined in this study, the viruses were able to break through the maternal immunity at 14 and 21 days of age but not at 7 days of age. A similar scenario was observed on the six broiler farms that had these viruses. The phylogeographic data suggest this population of IBDV has been restricted for more than 14 yr to northeast Ohio. Because commercially available classic and variant vaccines do not effectively control this population of IBDV, other alternatives are needed.

Evidencia molecular de una población geográficamente restringida del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa.

Se identificó una población de virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa en el noreste de Ohio que parece estar restringida geográficamente. Se examinaron trece granjas de pollos de engorde que contenían un total de 36 casetas para determinar la presencia del virus de Gumboro. Veinticuatro de las 36 casetas fueron positivas para el virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa y de esos virus, quince fueron detectados en seis granjas de pollos de engorde diferentes y formaron un grupo filogenético único. Mediante el análisis de la secuencia de nucleótidos se identificó ácido glutámico (E) en la posición 253 en estos quince virus. Solamente otro virus de la base de datos GenBank que también provenía de la parte noreste de Ohio contenía esta mutación. Todos los 15 virus de este estudio y el virus encontrado en GenBank también tenían una única secuencia de VP1. Los aminoácidos localizados en la posición 253 en la proteína VP2 son típicamente histidina (en virus atenuados) y glutamina (en virus patógenos). Debido a que el aminoácido 253 se ha relacionado con la patogenicidad de virus de Gumboro, dos virus de una población con un residuo de ácido glutámico en la posición 253 (E253) fueron seleccionados para estudios de patogenicidad. Se observó que fueron patogénicos para pollos de cuatro semanas de estirpe ligera y libres de patógenos específicos. Cuando estos dos virus fueron usados para desafiar a los pollos de engorde de una parvada de reproductores que suministra las aves a las 13 granjas de pollos examinadas en este estudio, los virus fueron capaces de traspasar la inmunidad materna a los 14 y 21 días de edad, pero no a los 7 días de edad. Se observó un escenario similar en las seis granjas de pollos que tenían estos virus. Los datos de los estudios filogenéticos sugieren que esta población de virus de Gumboro se ha restringido desde hace más de 14 años en la parte noreste de Ohio. Debido a que las vacunas disponibles comercialmente con virus clásicos y variantes no controlan eficazmente esta población del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa, otras alternativas son necesarias.

A limited outbreak of nephropathogenic infectious bronchitis (NIB) occurred in three Delmarva (DMV) commercial broiler chicken flocks in 2011. Isolates of NIB virus (NIBV)—DMV/1639/11, DMV/3432/11, and DMV/3902/11—were characterized by sequence analysis of the N-terminal subunit (S1) of the spike (S) gene. Findings indicated that the isolates were identical to each other and to PA/9579A/10, a 2010 isolate from poultry in Pennsylvania. The 2010 and 2011 isolates appear to have originated from a 1997–2000 NIB outbreak in Pennsylvania. DMV/1639/11 and PA/9579A/10 were determined to be nephropathogenic in susceptible chickens, yielding virus reisolations from kidney and inducing characteristic interstitial nephritis microscopic lesions. In a controlled laboratory study, 40% of chickens vaccinated with a combination live vaccine containing infectious bronchitis virus (IBV) strains Massachusetts (Mass) Connecticut (Conn) were positive on virus isolation attempts after challenge with DMV/1639/11, compared with only 13% of Mass Arkansas (Ark) vaccinates. Both combination vaccines gave partial protection against the development of DMV/1639/11-induced renal lesions. Although numerically fewer chickens vaccinated with Mass Conn had interstitial nephritis compared with those vaccinated with Mass Ark, neither vaccine combination offered greater protection (P < 0.05) than observed in unvaccinated chickens challenged with DMV/1639/11. Mass Ark vaccinations, applied under commercial conditions in the hatchery (spray) and on-farm (spray), did not protect the trachea or kidney from DMV/1639/11 challenge. Serologic testing of broiler flocks found <3% (2 of 69) tested to possess specific antibodies to DMV/1639/11, indicating the virus had not become established in the region.

Caracterización del virus nefropatogénico de la bronquitis infecciosa DMV/1639/11 aislado de pollos de engorde en el área de Delmarva en el año 2011.

Se presentó un brote limitado de bronquitis infecciosa nefropatogénica (NIB) en tres parvadas comerciales de pollos de engorde en el año 2011 en el área de Delmarva. Se caracterizaron los aislamientos de virus nefropatogénicos de bronquitis infecciosa DMV/1639/11, DMV/3432/11 y DMV/3902/11 se caracterizaron mediante el análisis de la secuencia del gene de la subunidad S1 de la espícula (S). Los resultados indicaron que los aislamientos eran idénticos entre sí y con el aislamiento PA/9579A/10, que es un aislamiento de aves comerciales en Pennsylvania del año 2010. Las cepas de los años 2010 y 2011 parecen haberse originado a partir de un brote de bronquitis infecciosa nefropatogénica que se presentó entre los años 1997 al 2000 en Pennsylvania. Se determinó que los aislamientos DMV/1639/11 y PA/9579A/10 eran nefropatogénicos en pollos susceptibles, que eran reaislados del riñón e inducían las lesiones de nefritis intersticial microscópica característica. En un estudio controlado de laboratorio, el 40% de los pollos vacunados con una vacuna viva que contenía la combinación cepas Massachussets (Mass) y Connecticut (Conn) fueron positivos a los intentos de aislamiento del virus después del desafío con el virus DMV/1639/11, en comparación con sólo el 13% de los pollos vacunados con la combinación Massachussets y Arkansas (Ark). Ambas combinaciones de vacunas confirieron una protección parcial contra el desarrollo de las lesiones renales inducidas por el virus DMV/1639/11. Aunque un número menor de los pollos vacunados con la combinación Massachussets y Connecticut mostraron nefritis intersticial en comparación con los pollos vacunados con Massachussets y Arkansas, ninguna combinación de vacunas ofreció una mayor protección (P < 0.05) que la observada en los pollos no vacunados y desafiados con el virus DMV/1639/11. Las vacunaciones con la combinación Massachussets y Arkansas, aplicadas en condiciones comerciales en la planta de incubación (

The current reticuloendotheliosis virus (REV) antibody detection kit that uses enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) needs concentrated virus, which is difficult to obtain due to its poor propagation in cells. In addition, this kit detects only chicken antibody but not other species. To overcome these disadvantages, we cloned and expressed REV env gene to develop monoclonal antibodies (mAbs), which we used for antibody detection in ELISA. Three mAbs were prepared from mice. These three mAbs could recognize REVs from ducks and geese by immunodot assay. In addition, the epitopes that the three mAbs recognized were determined by using three different env protein fragments by western blotting. One mAb was used to develop a blocking ELISA (bELISA) coated with expressed env protein to detect anti-REV antibody in chicken serum. This assay had a 98.8% (79/80) agreement with a commercial ELISA kit. Another 146 chicken sera with known neutralization antibodies were used as positive controls to evaluate this bELISA. The sensitivity and specificity this bELISA were 88.9% (40/45) and 94.8% (91/96), respectively. Thus, this bELISA could be used for anti-REV antibody detection in birds.

Detección de anticuerpos contra el virus de la reticuloendoteliosis mediante el ensayo de inmunoabsorción con enzimas ligadas en formato de bloqueo con la expresión de la proteína de de la envoltura.

El estuche actual para la detección de anticuerpos contra la reticuloendoteliosis (REV) que utiliza un ensayo de inmunoabsorción con enzimas ligadas (ELISA) necesita virus concentrado, que es difícil de obtener debido a su baja propagación en células. Además, este estuche detecta sólo los anticuerpos de pollo, y no de otras especies. Para superar estas desventajas, se clonó y se expresó el gene env del virus de la reticuloendoteliosis para desarrollar anticuerpos monoclonales, que se utilizaron para la detección de anticuerpos por ELISA. Se prepararon tres anticuerpos monoclonales a partir de ratones. Estos tres anticuerpos pudieron reconocer virus de reticuloendoteliosis de patos y gansos por un ensayo inmunodot . Además, se determinaron los epítopos que los tres anticuerpos monoclonares reconocieron mediante el uso de tres diferentes fragmentos de la proteína env por inmunotransferencia Western. Un anticuerpo monoclonal fue usado para desarrollar un ELISA de bloqueo (bELISA) recubierto con una proteína env expresada y se utilizó para detectar anticuerpos anticuerpos contra el virus de la reticuloendoteliosis en el suero de pollos. Este ensayo mostró una concordancia del 98.8% (79/80) con un estuche comercial de ELISA. Otros 146 sueros de pollos reconocidos por contener anticuerpos neutralizantes fueron utilizados como controles positivos para evaluar este método de ELISA de bloqueo. La sensibilidad y la especificidad del método de ELISA de bloqueo fueron del 88.9% (40/45) y del 94.8% (91/96), respectivamente. Por lo tanto, este método de ELISA de bloqueo podría ser utilizado para la detección de anticuerpos contra el virus de la reticuloendoteliosis en aves.

In December of 2008 very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) was identified in a commercial flock in northern California. Since then several other backyard and commercial facilities in California have had flocks affected by the same strain and other unique (previously unseen) strains of IBDV. Previous to this incident, very virulent infectious bursal disease (vvIBD) had never been identified in North America. Following the initial outbreak in 2008, California became the first state to undertake a voluntary surveillance effort to try to determine the geographical prevalence of vvIBD based on sequencing of a portion of the segment A region of the vvIBDV genome. To date we have complete geographical information on approximately 500 separate accessions representing approximately 1500 birds from over 200 commercial (∼85% of the facilities) and backyard facilities (∼15% of the facilities) throughout the state. Sequencing of targeted regions of both the segment A and segment B regions of the genome has revealed three distinct types of IBDV in California chickens. One type is genetically and in pathogenically consistent with vvIBDV. The second and third types only have a segment A region consistent with vvIBDV. Geographic information system mapping coupled with spatial-temporal cluster analysis identified significant spatial and time-space clustering; however, no temporal clustering was noted. The lack of temporal clustering coupled with negative vvIBDV results in tested avian wildlife implies that avian wildlife in California do not currently appear to play a significant role in vvIBDV transmission. In the voluntary surveillance that was done in the Central Valley of California, which has a high density of commercial poultry, no positive farms were found when 142 of 504 farms were sampled. Given this level of sampling, the confidence (probability) of detecting an affected commercial flock was calculated to be between 28% and 81% depending on whether one or five hypothetically affected farms were affected.

Epidemiología histórica, espacial y espacio-temporal del virus muy virulento de la enfermedad infecciosa de la bolsa en California: Un estudio retrospectivo 2008–2011.

En diciembre del 2008, se identificó un virus muy virulento de la enfermedad infecciosa de la bolsa (con las siglas en inglés vvIBDV) en un lote comercial en el norte de California. Desde entonces, varias instalaciones avícolas comerciales y de traspatio en California han tenido parvadas afectadas por la misma cepa y otra cepa única (no detectada anteriormente) del virus de Gumboro. Antes de este incidente, el virus muy virulento de la enfermedad infecciosa de la bolsa nunca había sido identificado en América del Norte. Después del brote inicial en el año 2008, California se convirtió en el primer estado en realizar un esfuerzo voluntario de vigilancia para determinar la prevalencia geográfica del virus muy virulento de Gumboro basado en el análisis de secuencias de una porción del segmento A del genoma de este virus muy virulento. Hasta la fecha se cuenta con información geográfica completa de aproximadamente 500 registros de diagnóstico diferentes que representan aproximadamente 1,500 aves de más de 200 instalaciones comerciales (aproximadamente el 85% de las instalaciones) y de las instalaciones de traspatio (aproximadamente el 15% de las instalaciones) en todo el estado. El análisis de las secuencias de las regiones blanco de los segmentos A y B del genoma ha revelado tres tipos distintos de cepas del virus de Gumboro en pollos de California. Un tipo es genética y patogénicamente similar con el virus muy virulento de Gumboro. El segundo y tercer tipos solo tienen un segmento A similar a las cepas virulentas. El mapeo por sistemas de información geográfica (con las siglas en inglés GIS), junto con el análisis de conglomerados espacio-temporales identificaron agrupamientos espaciales y espac

Clinical signs such as respiratory signs, egg drop, and mortality have been reported in field cases of low pathogenic avian influenza by H9N2 avian influenza virus (AIV) but have rarely been reproduced by the virus alone. Thus, virus reisolation rates and titers in tissues were measured for vaccine efficacy testing. In the present study, we established a clinical sign-based vaccine efficacy test by reproduction of highly frequent conjunctivitis (77.8%–90%) via binocular instillation of an H9N2 virus (01310 strain, 1 × 10⁶ EID₅₀/10 µl for each eye). Specific-pathogen-free chickens were assigned to vaccine and control groups, and the vaccine group was inoculated intramuscularly with a commercial H9N2 inactivated oil emulsion vaccine. The chickens were challenged by 01310 via binocular instillation at 2 and 4 wk postvaccination (WPV). The positive rates of conjunctivitis and virus reisolation were significantly different between the vaccine and control groups (conjunctivitis at 2 WPV, 0% vs. 77.8%, and at 4 WPV, 0% vs. 80%). Vaccine antibody was detected in tears as well as in serum samples of the vaccine group before challenge. The conjunctivitis model may be useful for efficacy testing of AI vaccine due to a clinical symptom-based read of results, but further efficacy testings with different types, doses of AI vaccines, and challenge viruses will be required to complete the evaluation of our model.

Modelo de conjuntivitis inducida por el virus de la influenza aviar H9N2 para la evaluación de la eficacia de vacunas.

Los signos clínicos tales como signos respiratorios, caída de la producción de huevo y mortalidad han sido reportados en casos de campo del virus de la influenza aviar de baja patogenicidad H9N2, pero rara vez se han reproducido estos signos con la inoculación única de este virus. Por lo tanto, se midieron los porcentajes de aislamiento del virus y los títulos en los tejidos para evaluar la eficacia de la vacuna. En el presente estudio, se ha establecido una evaluación basada en los signos clínicos para evaluar la eficacia de las vacunas mediante la reproducción de la conjuntivitis que es frecuente (77.8%–90%) mediante la instilación en los dos ojos de un virus H9N2 (cepa 01310, con un título de 1 × 10⁶ dosis infectantes 50% en embrión de pollo por 10 µl, inoculadas en cada ojo). Aves libres de patógenos específicos se asignaron a los grupos vacunados y controles, las aves del grupo vacunado fueron inoculadas por vía intramuscular con una vacuna inactivada comercial emulsionada en aceite con el subtipo H9N2. Los pollos fueron desafiados por instilación en los dos ojos con la cepa 01310 a las dos y cuatro semanas después de la vacunación. Los porcentajes de aves con conjuntivitis y de aislamiento del virus fueron significativamente diferentes entre los grupos de aves vacunadas y controles (presencia de conjuntivitis a las dos semanas después de la vacunación fue de cero por ciento contra 77.8%, respectivamente y a las cuatro semanas después de la inoculación fue de cero por ciento contra 80%, respectivamente). Se detectaron anticuerpos contra la vacuna en las lágrimas, así como en las muestras de suero del grupo vacunado antes del desafío. Este modelo utilizando el desarrollo de la conjuntivitis puede ser útil para las evaluación de la eficacia de las vacunas de influenza aviar debido a la detección de los signos clínicos, pero se requiere llevar a cabo pruebas de eficacia adicionales con diferentes tipos y dosis de vacunas contra la influenza aviar y con virus de desafío distintos para completar la evaluación de este modelo.

An attenuated Salmonella (Δlon, ΔcpxR, and ΔasdA16) delivery system containing the genes encoding P-fimbriae (papa and papG), aerobactin receptor (iutA), and CS31A surface antigen (clpG) of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) was constructed, and its potential as a vaccine candidate against APEC infection in chickens was evaluated. The birds were divided into three groups designated group A (nonvaccinated control), group B (given a single immunization), and group C (administered prime and boost immunizations). Prime and booster vaccinations with the constructions were administered to 1-day-old and 14-day-old birds, respectively. Immune responses were measured postimmunization, and the birds were challenged via an intra–air sac route with a virulent APEC strain at the second, third, and fourth weeks of age. Group B birds were partially protected against the challenge and showed increased levels of plasma immunoglobulin (Ig)G, mucosal IgA antibodies, and lymphocyte proliferation. Group C birds showed greater protection against the challenge, with significantly stronger immune responses compared with the birds in the other groups. Overall, our data suggest that the Salmonella delivery system with recombinant constructs is capable of inducing robust immune responses and induces effective protection against colibacillosis caused by APEC.

Construcción de un sistema de aplicación de vacunas utilizando una Salmonella atenuada que contiene los genes que codifican varios factores de virulencia de Escherichia coli y su potencial como un candidato de vacuna para la colibacilosis del pollo.

Se construyó un sistema de aplicación utilizando una Salmonella atenuada (Δlon, ΔcpxR, y ΔasdA16) que contiene los genes que codifican las fimbrias P (papa y papG), el gene del receptor de la aerobactina (iutA), y el antígeno de superficie CS31A (clpG) de cepas de Escherichia coli patógenas para las aves (con las siglas en inglés APEC), y se evaluó su potencial como una vacuna contra la infección por APEC en pollos. Las aves se dividieron en tres grupos designados como grupo A (control no vacunados), grupo B (con una sola inmunización), y el grupo C (con primoinmunizaciones e inmunizaciones de refuerzo). Las primovacunaciones y las vacunaciones de refuerzo con los constructos se administraron en aves de un día y de 14 días de edad, respectivamente. Las respuestas inmunes se midieron después de la inmunización, y las aves fueron desafiadas a través de una ruta de inoculación directa en el saco aéreo con una cepa virulenta de APEC en la segunda, tercera, y cuarta semana de edad. Las aves del Grupo B estuvieron parcialmente protegidas contra el desafío y mostraron niveles elevados de inmunoglobulinas plasmáticas (Ig) G, anticuerpos de mucosas tipo IgA y proliferación de linfocitos. Las aves del Grupo C mostraron una mayor protección contra el desafío, con respuestas inmunes significativamente más fuertes en comparación con las aves de los otros grupos. En general, estos datos sugieren que el sistema de aplicación utilizando un constructo recombinante de Salmonella es capaz de inducir respuestas inmunitarias robustas e induce una prot

During the spring and summer of 2011, the Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory at the University of Minnesota received 14 submissions of 15-to-18-week-old tom turkeys that were recumbent with wing tip bruises (“wing walkers”) and uni- or bilateral swelling of the hock (tibiotarsal) joints. Gastrocnemius or digital flexor tendons were occasionally ruptured. A total of five turkey arthritis reoviruses (TARV-MN1 through TARV-MN5) were isolated in specific-pathogen-free embryonated chicken eggs and QT-35 cells. The identity of the isolates was confirmed by electron microscopy, reverse transcription-polymerase chain reaction, and gene sequence analysis. BLAST analysis on the basis of a 880 bp nucleotide sequence of the S4 gene confirmed all isolates as a reovirus. Phylogenetic analysis divided the five isolates into two subgroups: subgroup I containing TARV-MN1, -2, -3, and -5, and the other subgroup containing TARV-MN4. Isolates in subgroup I had a similarity of 97%–100% with each other, while subgroup II (TARV-MN4) had a similarity of only 89.2% with subgroup I viruses. This isolate showed 90%–93% similarity with turkey enteric reoviruses in the United States, while the other four isolates in subgroup I had 89%–97.6% similarity. These results indicate divergence within TARVs as well as from enteric viruses, which needs to be confirmed by complete genome sequence analysis. Further experimental studies are planned to determine the role of these isolates in turkey arthritis and to compare them with classical chicken reovirus.

Aislamiento y caracterización de un reovirus asociado con artritis en pavos.

Durante la primavera y el verano del año 2011, el Laboratorio de Diagnóstico Veterinario el Estado de Minnesota en la Universidad de Minnesota recibió 14 casos de pavos machos de 15 a 18 semanas de edad, que mostraron recumbencia con moretones en la punta del ala (“aves que caminan con las alas”) e inflamación de la articulación del corvejón (articulación tibiotarsal) uni o bilateral. Ocasionalmente, los tendones del músculo gastrocnemio o flexores digitales se observaron rotos. Un total de cinco reovirus asociados con artritis en pavos (denominados TARV-MN1 al TARV-MN5) se aislaron en huevos embrionados de pollo libres de patógenos específico y en células QT-35. La identidad de los aislados se confirmó mediante microscopía electrónica, por transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa, y por el análisis de secuencias. Mediante el análisis con la base de datos BLAST de las secuencias de nucleótidos de productos de 880 pares de bases que incluían al gene S4 confirmaron a todos los aislamientos como reovirus. El análisis filogenético dividió a los cinco aislamientos en dos subgrupos: subgrupo I que contenía a los virus TARV-MN1, TARV-MN2, TARV-MN3 y TARV-MN5 y el otro subgrupo que incluía al virus TARV-MN4. Los aislados en el subgrupo I mostraron una similitud de 97% -100% entre ellos, mientras que el subgrupo II (TARV-MN4) mostró una similitud de sólo 89.2% con los virus de subgrupo I. Este aislamiento mostró una similitud de 90%–93% con reovirus de pavo entéricos en los Estados Unidos, mientras que otros cuatro aislados en el subgrupo I mostraon una similitud de 89%–97.6%. Estos resultados indican divergencia dentro de los reovirus asociados con artritis en pavos, así como de los virus entéricos, lo cual debe ser confirmado por el análisis de las secuencias completas del genoma. Se han planeado otros estudios experimentales para determinar el papel de estos aislamientos en la artritis de los pavos y compararlas con reovirus de pollo clásicos.

To examine the correlations between virulence genotyping and multilocus sequence analysis of Escherichia coli from poultry and humans, 88 isolates were examined. The isolates were selected from a population of over 1000 based on their assignment to nine different virulence genotyping clusters. Clustering based on multilocus sequence analysis mostly correlated with virulence genotyping, although multilocus sequence analysis demonstrated higher discriminatory ability and greater reliability related to inferred phylogenetic relationships. No distinct patterns in host source were observed using inferred phylogeny through multilocus sequence analysis, indicating that human, avian, and retail meat isolates are diverse, and some belong to multiple shared clonal complexes. Clonal complexes with host source overlap included ST95 and ST23 and additional novel groups, underscoring the diversity of avian pathogenic E. coli and the potential importance of these novel groups as avian and zoonotic pathogens.

Nota de Investigación—Comparación entre el análisis de secuencias multilocus y la genotipificación por virulencia de cepas de Escherichia coli obtenidas de aves vivas, de expendios de venta de carne de aves al menudeo y de infecciones extraintestinales en humanos.

Para examinar las correlaciones entre la genotipificación por virulencia y el análisis de secuencias multilocus de cepas de Escherichia coli obtenidas de aves de corral y de humanos, se examinaron 88 aislamientos. Los aislados fueron seleccionados de una población de más de 1000 con base en su asignación en nueve grupos diferentes de genotipos de virulencia. El agrupamiento basado en el análisis de secuencias multilocus mostró correlación principalmente con la genotipificación por virulencia, aunque el análisis de secuencias multilocus demostró poseer mayor capacidad discriminatoria y una mayor confiabilidad de acuerdo con las relaciones filogenéticas inferidas. No se observaron patrones distintos con relación a los hospederos mediante inferencias basadas en la filogenia por el análisis de secuencias multilocus, lo que indica que los aislamientos de humanos, de aves y de expendios de venta de carne son diversos, y algunos pertenecen a complejos clonales múltiples compartidos. Los complejos clonales con hospederos de origen comunes incluyeron los grupos ST95 y ST23 y los grupos adicionales nuevos subrayan la diversidad de cepas patógenas de E. coli y la importancia potencial de estos nuevos grupos como patógenos aviares y zoonóticos.

Blood samples were collected from 65 free-ranging birds from six species in the southern North Island of New Zealand. Sera from the birds were tested for the presence of avipoxvirus (APV) antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and blood cells from 55 birds were also tested for Plasmodium spp. by PCR. Forty-five birds (69.2%) tested seropositive to APV. Song thrushes (Turdus philomelos) presented the highest seroprevalence at 100% (4/4), followed by Eurasian blackbirds (Turdus merula) (96.86%, 31/32), chaffinches (Fringilla coelebs) (54.55%, 6/11), starlings (Sturnus vulgaris) (25%, 3/12), greenfinches (Carduelis chloris) (25%, 1/4), and European goldfinches (Carduelis carduelis) (0%, 0/2). Plasmodium spp. DNA was detected in 15/55 birds (27.3%), including 11 Eurasian blackbirds, one song thrush, and three starlings. Eight Eurasian blackbird isolates (73%) grouped within the subgenus Novyella. Two Eurasian blackbird isolates and the song thrush isolate clustered within a different group with previously reported lineages LINN1 and AFTRU5. In addition, all three starling isolates clustered within the well-characterized lineage Plasmodium (Huffia) elongatum GRW06. All Plasmodium-positive Eurasian blackbirds and the song thrush were seropositive to APV, whereas only 67% of Plasmodium-positive starlings showed evidence of previous exposure to APV. A significant relationship between birds seropositive to APV and birds infected by Plasmodium spp. was observed (χ²  =  5.69, df  =  1, P  =  0.0086). To the authors' knowledge this is the first report describing the seroprevalence of APV and its association with Plasmodium spp. infection in introduced bird species in New Zealand.

Nota de Investigación—Seroprevalencia de avipoxvirus y su asociación con malaria aviar (Plasmodium spp.). Infección en aves paseriformes introducidas en la región del sur de la Isla Norte de Nueva Zelanda.

Se recolectaron muestras de sangre de 65 aves de seis especies mantenidas en libertad de la parte sur de la Isla Norte de Nueva Zelanda. Los sueros de las aves fueron analizados para detectar la presencia de anticuerpos contra avipoxvirus (APV) mediante la prueba de inmunoabsorción con enzimas ligadas (ELISA), y también se analizaron las células sanguíneas de 55 aves para detectar la presencia de Plasmodium spp. por PCR. Cuarenta y cinco aves (69.2%) dieron un resultado positivo para avipoxvirus. Los zorzales comunes (Turdus philomelos) presentaron la mayor seroprevalencia con un 100% (4/4), seguidos de los mirlos comunes (Turdus merula) (96.86%, 31/32), pinzones vulgares (Fringilla coelebs) (54.55%, 6/11), estorninos pintos (Sturnus vulgaris) (25%, 3/12), verderones comunes (Carduelis chloris) (25%, 1/4) y jilgueros (Carduelis carduelis) (0%, 0/2). Se detectó ADN de Plasmodium spp. en 15 aves de un total de 55 (27.3%), incluyendo 11 mirlos comunes, un zorzal común, y tres estorninos pintos. Ocho aislamientos de mirlos comunes (73%), se agruparon en el subgénero Novyella. Dos cepas de mirlos y el aislam

Campylobacter jejuni, a gram-negative motile bacterium commonly found in the chicken gastrointestinal tract, is one of the leading causes of bacterial gastroenteritis in humans worldwide. An intact and functional flagellum is important for C. jejuni virulence and colonization. To understand the role of C. jejuni motility in adherence and internalization in polarized Caco-2 cells and in cecal colonization of chickens we constructed a C. jejuni NCTC11168 V1 ΔmotAB mutant. The motAB genes code for the flagellar motor, which enables the rotation of the flagellum. The nonmotile ΔmotAB mutant expressed a full-length flagellum, which allowed us to differentiate between the roles of full-length flagella and motility in the ability of C. jejuni to colonize. To study the adherence and invasion abilities of the C. jejuni ΔmotAB mutant we chose to use polarized Caco-2 cells, which are thought to be more representative of in vivo intestinal cell architecture and function. Although the C. jejuni ΔmotAB mutant adhered significantly better than the wild type to the Caco-2 cells, we observed a significant reduction in the ability to invade the cells. In this study we obtained evidence that the flagellar rotation triggers C. jejuni invasion into polarized Caco-2 cells and we believe that C. jejuni is propelled into the cell with a drill-like rotation. The ΔmotAB mutant was also tested for its colonization potential in a 1-day-old chicken model. The nonmotile C. jejuni ΔmotAB mutant was not able to colonize any birds at days 3 and 7, suggesting that motility is essential for C. jejuni colonization.

Nota de Investigación—Papel del gene motAB en la adherencia e internalización de Campylobacter jejuni en células Caco-2 polarizadas y en su colonización cecal.

Campylobacter jejuni, una bacteria gram negativa móvil que se encuentran comúnmente en el tracto gastrointestinal de pollo, es una de las principales causas de gastroenteritis bacteriana en los seres humanos en todo el mundo. Un flagelo intacto y funcional es importante para la virulencia y la colonización por C. jejuni. Para entender el papel de la motilidad de C. jejuni en la adherencia e internalización en células Caco-2 polarizadas y en la colonización cecal en pollos, se construyó una mutante de C. jejuni denominada NCTC11168 V1 ΔmotAB. Los genes motAB codifican para el motor flagelar, que permite la rotación del flagelo. La mutante no móvil ΔmotAB expresaba un flagelo completo, lo que permitió diferenciar entre las funciones de los flagelos completos y la movilidad en la capacidad de C. jejuni para colonizar. Para estudiar la capacidad de adherencia y la invasividad de la mutante de C. jejuni denominada ΔmotAB se optó por utilizar células Caco-2 polarizadas, que se cree que son más representativas de la arquitectura de las células intestinales y de

Previously we identified a novel parvovirus from enteric contents of chickens that were affected by enteric diseases. Comparative sequence analysis showed that the chicken parvovirus (ChPV) represented a new member in the Parvoviridae family. Here, we describe some of the pathogenic characteristics of ChPV in young broilers. Following experimental infection, 2-day-old broiler chickens showed characteristic signs of enteric disease. Runting-stunting syndrome (RSS) was observed in four of five experimental groups with significant growth retardation between 7 and 28 days postinoculation (DPI). Viral growth in small intestine and shedding was detected at early times postinoculation, which was followed by viremia and generalization of infection. ChPV could be detected in most of the major tissues for 3 to 4 wk postinoculation. Immunohistochemistry staining revealed parvovirus-positive cells in the duodenum of inoculated birds at 7 and 14 DPI. Our data indicate that ChPV alone induces RSS in broilers and is important determinant in the complex etiology of enteric diseases of poultry.

Nota de Investigación—Síndrome de mala absorción en pollos de engorde jóvenes inducido por un parvovirus de los pollos.

Anteriormente se identificó un parvovirus nuevo de muestras de contenidos intestinales de pollos que estaban mostrando trastornos entéricos. El análisis comparativo de las secuencias mostró que el parvovirus de pollo (ChPV) representa a un nuevo miembro de la familia de parvovirus. En este trabajo, se describen algunas de las características patogénicas de este parvovirus en pollos jóvenes. Después de la infección experimental, pollos de engorde de dos días de edad mostraron signos característicos de enfermedad entérica. El síndrome de mala absorción se observó en cuatro de los cinco grupos experimentales con retraso en el crecimiento significativo después de la inoculación entre los siete y 28 días después de la inoculación. Se detectaron replicación y eliminación viral en el intestino delgado en etapas tempranas después de la inoculación, que fueron seguidos por viremia y generalización de la infección. El parvovirus de los pollos pudo ser detectado en la mayoría de los tejidos principales de tres a cuatro semanas después de la inoculación. La tinción por inmunohistoquímica reveló células positivas a la presencia de parvovirus en el duodeno de aves inoculadas de siete a catorce días después de la inoculación. Nuestros datos indican que el parvovirus de los pollos solo induce el síndrome de mala absorción en pollos de engorda y es un determinante importante en la etiología compleja de las enfermedades entéricas de las aves de corral.

Toxoplasma gondii is a parasitic protozoan that infects nearly one-third of humans. The present study was performed to isolate and genotype T. gondii from free-range ducks in Malaysia. Sera, heads, and hearts from 205 ducks were obtained from four states in Peninsular Malaysia, and 30 (14.63%) sera were found to be seropositive when assayed with the modified agglutination test (MAT ≥ 1∶6). All the positive samples were inoculated into mice, and T. gondii was successfully isolated from four individual duck samples (1.95%), which were initially found to be strongly seropositive (MAT ≥ 1∶24). The isolates were subjected to PCR-RFLP analysis, and two T. gondii strains were identified: type I and type II. This is the first reported study on the genetic characterization of T. gondii isolates from free-range farm animals in Southeast Asia.

Nota de Investigación—Aislamiento y genotipificación de Toxoplasma gondii de patos criados en semi-pastoreo en Malasia.

Toxoplasma gondii es un parásito protozoario que infecta a casi un tercio de los seres humanos. El presente estudio se realizó para aislar y genotipificar T. gondii de patos criados en semi-pastoreo en Malasia. Se obtuvieron muestras de suero, cabezas y corazones de 205 patos de cuatro estados de Malasia Peninsular. Treinta sueros (14.63%) resultaron positivos cuando se analizaron mediante una prueba de aglutinación modificada (MAT ≥ 1∶6). Todas las muestras positivas fueron inoculadas en ratones, y T. gondii se aisló con éxito a partir de cuatro muestras individuales de patos (1.95%), los cuales resultaron ser fuertemente seropositivos (MAT ≥ 1∶24) inicialmente. Los aislados fueron sometidos al análisis por PCR-RFLP y se identificaron dos cepas de T. gondii: tipo I y tipo II. Este es el primer estudio publicado sobre la caracterización genética de cepas de T. gondii a partir de animales mantenidos en semi-pastoreo en el sudeste de Asia.

This study reports the gross and microscopic pathology of naturally occurring neoplasms in adult pigeons that were presented for necropsy at the Indiana Animal Disease Diagnostic Laboratory from 2001 to 2011. The study population consisted of white carneau and mixed-breed pigeons used in behavioral studies in the Department of Psychological Sciences at Purdue University. Twelve types of neoplasms or proliferative disorders were identified in 28 of 83 pigeons (33.7%). Five pigeons had two or three types of neoplasms–proliferative disorders. Of the 83 pigeons, 11 (13.3%) had seminoma, five (6.0%) had thyroid adenoma, four (4.8%) had lymphoma, four (4.8%) had adenocarcinoma of female reproductive tract origin, two (2.4%) had pulmonary carcinoma, and two (2.4%) had cutaneous vascular hamartomas. Also identified were single incidences of dysgerminoma, mesothelioma, liposarcoma, cloacal papilloma, cloacal adenocarcinoma, and gizzard carcinoma. The most frequently occurring tumor was seminoma; 7/11 cases effaced both testicles and 3/11 cases had metastasis to the liver or kidney. The relatively high prevalence of neoplasms in pigeons in the present study is most likely related to the advanced ages of pigeons kept in the research colony.

Reporte de Caso—Neoplasias presentes de manera natural en palomas de una colonia de investigación: Estudio retrospectivo.

Este estudio muestra la patología macroscópica y microscópica de las neoplasias de origen natural en palomas adultas que se presentaron para necropsia en el Laboratorio de Diagnostico de Enfermedades de los Animales en Indiana desde el año 2001 hasta el 2011. La población de estudio consistió en palomas blancas Carneau y palomas mestizas utilizadas en los estudios de comportamiento del Departamento de Ciencias Psicológicas de la Universidad Purdue. Se identificaron doce tipos de tumores o de trastornos proliferativos en 28 de 83 palomas (33.7%). Cinco palomas tenían dos o tres tipos de neoplasias o trastornos proliferativos. De las 83 palomas, 11 (13.3%) tenían seminoma, cinco (6.0%) tenían adenoma de la tiroides, cuatro (4.8%) tenían linfoma, cuatro (4.8%) tuvieron adenocarcinoma con origen en el tracto reproductivo femenino, dos (2.4%) tenían carcinoma pulmonar, y dos (2.4%) tenían hamartomas vasculares cutáneos. También se identificaron incidencias individuales de disgerminoma, mesotelioma, liposarcoma, papiloma cloacal, adenocarcinoma cloacal, y carcinoma de la molleja. El tumor más frecuente fue el seminoma; siete de once abarcaron totalmente ambos testículos y tres de once casos mostraron metástasis en el hígado o el riñón. Es muy probable que la prevalencia relativamente alta de neoplasias en las palomas en el presente estudio esta relacionada con las edades avanzadas de las palomas mantenidas en la colonia de investigación.

This report describes a case of total anomalous pulmonary venous connection (TAPVC) in a 5-wk-old male white leghorn chicken that presented with growth retardation. This chicken was a specific-pathogen-free chicken bred in an isolator. At 5 wk of age, the chicken was euthanatized and autopsied. Macroscopically, the right ventricle and right atrium were significantly enlarged whereas the left atrium was small and blind-ending with no connection to the pulmonary veins. The pulmonary veins were connected directly to the right atrium. The above abnormality was accompanied by an ostium secundum-type atrial septal defect. No other malformations were observed. TAPVC is a very rare congenital cardiac abnormality that has not been reported in avian species to date.

Reporte de Caso—Anormalidad total de la conexión de las venas pulmonares en un pollo.

Este informe describe un caso de anormalidad total en la conexión total de las venas pulmonares en un pollo Leghorn blanco macho de cinco semanas de edad que presentaba retraso en el crecimiento. Este era un pollo libre de patógenos específicos criado en una unidad de aislamiento. A las cinco semanas de edad, se realizó la eutanasia de los pollos y posteriormente la necropsia. Macroscópicamente, el ventrículo y la aurícula derechos estaban agrandados significativamente mientras que la aurícula izquierda era pequeña estaba cerrada y sin ninguna conexión con las venas pulmonares. Las venas pulmonares se conectaban directamente a la aurícula derecha. La anormalidad anterior estaba acompañada por un defecto del septo atrial del tipo ostium secundum. No se observaron otras malformaciones. Esta anormalidad total en la conexión de las venas pulmonares es una anomalía cardiaca congénita muy rara que no había sido reportado en la especie aviar hasta la fecha.

Colibacillosis in different forms is responsible for significant economic losses in the poultry industry worldwide. Escherichia coli strains frequently implicated in poultry disease are designated as avian pathogenic E. coli (APEC). Natural infections and disease due to APEC have been described in wild birds, but not as yet in red-legged partridges. During an outbreak in an experimental partridge farm, 23 of 43 1-day-old chicks belonging to the same batch died. Putative APEC strains were detected and isolated both in cloacal swabs and in tissues originating from the same individuals and from different birds showing similar clinical signs. This is the first study that identifies APEC strains linked to a colibacillosis outbreak in farmed red-legged partridges, and also confirms the importance of farmed partridges as fecal carriers and potential spreaders of APEC.

Reporte de Caso—Brote de colibacilosis en una granja de perdices rojas (Alectoris rufa).

La colibacilosis es uno de los procesos patológicos que más pérdidas económicas ocasiona para la industria avícola en todo el mundo. Las cepas de Escherichia coli implicadas en este proceso se conocen como E. coli patógenas aviares (APEC). En aves silvestres se han descrito infecciones naturales y casos de enfermedad causados por cepas APEC, pero en perdiz roja la información disponible al respecto es muy escasa. En el transcurso de un brote ocurrido en una granja experimental de perdiz, 23 de 43 pollitos de un día de edad pertenecientes a un mismo lote murieron. Se detectaron y aislaron cepas APEC tanto en muestras cloacales como en muestras de tejidos procedentes de un mismo animal y de animales distintos con la misma sintomatología. El presente estudio es el primero que confirma el papel de ciertas cepas APEC en los brotes de colibacilosis que tienen lugar en las granjas de perdiz, así como la importancia de la perdiz roja como portador fecal y diseminador potencial de este tipo de cepas.

Streptocara spp. infections are reported to cause gastritis, proventriculitis, esophagitis, and pharyngitis in various waterfowls, especially diving ducks. In the present paper, we describe severe fatal diphtheritic pharyngitis and esophagitis caused by Streptocara incognita in three female mute swans (Cygnus olor) in Bosnia and Herzegovina. Prior to death, the swans were showing signs of lethargy, anorexia, and reluctance to move. At necropsy, in all swans severe diphtheritic pharyngitis and esophagitis with deep, dark red hemorrhagic ulcerations were observed. Numerous thin, white, up to 1-cm-long nematodes, identified as S. incognita, were observed embedded in the pharyngeal and esophageal mucosa under the diphtheritic membranes. Histopathology revealed severe fibrinonecrotic inflammation with numerous cross-sections of the parasites. To the authors' knowledge, this is the first report of severe, fatal streptocariasis in mute swans.

Reporte de Caso—Faringitis y esofagitis verminosas fatales causadas por Streptocara incognita en cisnes vulgares (Cygnus olor).

Se ha reportado que las infecciones por Streptocara spp. son causantes de gastritis, proventriculitis, esofagitis y faringitis en aves acuáticas, sobre todo en diversos patos buceadores. En el presente trabajo se describe un caso severo y fatal de faringitis y esofagitis diftéricas causado por Streptocara incognita en tres cisnes vulgares (Cygnus olor) hembras en Bosnia y Herzegovina. Antes de la muerte, los cisnes mostraron signos de letargia, anorexia y renuencia a moverse. Durante la necropsia, se observó en todos los cisnes faringitis y esofagitis diftéricas severas y con profundas ulceraciones de color rojo oscuro y hemorrágicas. Numerosos nemátodos delgados de color blanco y de hasta un centímetro de largo, identificados como S. incognita, se observaron incrustados en la mucosa de la faringe y del esófago por debajo de las membranas diftéricas. La histopatología reveló inflamación fibrinonecrótica severa con numerosas secciones transversales de parásitos. De acuerdo al conocimiento de los autores, este es el primer reporte de streptocariasis grave y mortal en cisnes vulgares.

Colibacillosis, a disease caused by avian pathogenic Escherichia coli (APEC), can lead to great economic losses in the poultry industry. The aim of this study was to determine the prevalence of antibiotic resistance and antibiotic resistance patterns in APEC in Zimbabwe. From 503 chickens diagnosed with colibacillosis, 103 E. coli isolates were obtained. Isolation and identification of E. coli were carried out using microscopy and biochemical tests. The disc diffusion method was used to determine antibiotic susceptibility of the isolates to 8 commercial antibiotics. Many isolates exhibited resistance to more than one antibiotic. Antibiogram profiles indicated maximum resistance to tetracycline (100%), bacitracin (100%), and cloxacillin (100%) and a high prevalence of resistance to ampicillin (94.1%). However; there were high prevalences of sensitivity to ciprofloxacin (100%) and gentamycin (97.1%). The isolates showed moderate rates of sensitivity to chloramphenicol and neomycin. All isolates in this study showed multidrug resistance because they were all resistant to 3 or more antibiotics. Seven multidrug resistance patterns were observed. The most common pattern (resistance to ampicillin, bacitracin, cloxacillin, and tetracycline) was exhibited by 30 isolates. Our findings show that there is emerging drug resistance in APEC associated with colibacillosis in Zimbabwe. The observed high level of multidrug resistance could hamper the treatment of colibacillosis in Zimbabwe.

Reporte de Caso—Resistencia contra antimicrobianos de cepas Escherichia coli aisladas de pollos con colibacilosis en Harare, Zimbabwe y en zonas aledañas.

La colibacilosis es una enfermedad causada por cepas de Escherichia coli patógenas para aves (con las siglas en inglés APEC), esta enfermedad puede producir grandes pérdidas económicas en la industria avícola. El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia de la resistencia a antibióticos y los patrones de resistencia de E. coli patógena para aves en Zimbabwe. A partir de 503 pollos diagnosticados con colibacilosis, se obtuvieron 103 aislamientos de E. coli. El aislamiento e identificación de E. coli se llevó a cabo utilizando microscopía y pruebas bioquímicas. Se utilizó el método de difusión en disco para determinar la susceptibilidad de los aislamientos para ocho antibióticos comerciales. Muchas cepas mostraron resistencia a más de un antibiótico. Los perfiles de los antibiogramas indicaron la máxima resistencia para la tetraciclina (100%), bacitracina (100%), y cloxacilina (100%) y una alta prevalencia de la resistencia a la ampicilina (94.1%). Sin embargo, había una alta prevalencia de la sensibilidad a ciprofloxacina (100%) y gentamicina (97.1%). Las cepas mostraron tasas moderadas de sensibilidad a cloranfenicol y neomicina. Todas las cepas aisladas en este estudio mostraron resistencia a múltiples fármacos, ya que fueron resistentes a tres o más antibióticos. Se observaron siete patrones de resistencia a múltiples fármacos. El patrón más común (resistencia a la ampicilina, bacitracina, cloxacilina, y tetraciclina) fue exhibida por 30 aislamientos. Estos resultados muestran que existe una resistencia emergente de drogas en cepas de E. coli patógena para aves asociadas con colibacilosis en Zimbabwe. El alto nivel de resistencia a múltiples fármacos observado podría dificultar el tratamiento de la colibacilosis en Zimbabwe.

The role of live bird markets (LBMs) in the perpetuation of avian influenza virus (AIV) has been well studied worldwide; however, there is a paucity of information on the prevalence of different AIV subtypes in LBMs in Eastern China. In this study, long-term surveillance was conducted to investigate the prevalence of AIV in chickens, ducks, and geese in an LBM in Yangzhou city, Jiangsu province, Eastern China, between July 2002 and May 2011. The study used primary virus isolation and subtype-specific reverse-transcription–PCR. In total, 23 different HA–NA subtype combinations were detected, mainly in domestic ducks. This result suggests that domestic ducks play a more important role in LBMs in Eastern China.

Reporte de Caso—Prevalencia del virus de la influenza aviar de baja patogenicidad en un mercado de aves vivas en el este de China entre los años 2002–2011.

El papel de los mercados de aves vivas en la perpetuación del virus de la influenza aviar ha sido bien estudiado en todo el mundo, sin embargo, hay una escasez de información sobre la prevalencia de los diferentes subtipos del virus de influenza aviar en los mercados de aves vivas en el este de China. En este estudio, el seguimiento a largo plazo fue realizado para investigar la prevalencia del virus de influenza aviar en pollos, patos y gansos en un mercado de aves vivas en la ciudad de Yangzhou, provincia de Jiangsu, en la parte este de China, entre julio del 2002 y mayo del 2011. El estudio utilizó el aislamiento del virus primario y un método de transcripción reversa y PCR específico de subtipo. En total, se detectaron 23 diferentes combinaciones de subtipos de hemoaglutinina y neuraminidasa principalmente en los patos domésticos. Este resultado sugiere que los patos domésticos juegan un papel muy importante en los mercados de aves vivas en el este de China.

Avian adenovirus infections cause important disease complexes in chickens, but many of the viruses also infect chickens without resulting in overt disease. Previously several outbreaks of gizzard erosions caused by a fowl adenovirus A serotype-1 (FAdV-1) were reported from Japan. Here we report an outbreak of gizzard erosions in 12 broiler flocks in Germany in 2011. Chickens had a reduced daily weight gain and a higher total mortality rate of up to 8%. The birds showed a severe detachment of the koilin layer and ulcerative to necrotizing lesions of the underlying mucosa. Histopathologically, necrotizing ventriculitis with basophilic, intranuclear inclusion bodies in epithelial cells was diagnosed. Immunohistochemistry, egg culture, and electron microscopic examination revealed adenovirus-like particles in the samples. No concurrent infectious agent could be identified. The virus was genotyped as FAdV-1 by PCR and subsequent sequencing. Phylogenetic analysis of the hexon loop L1 gene yielded 100% sequence identity to the chicken embryo lethal orphan strain. These findings suggest that outbreaks of adenoviral gizzard erosion can lead to significant economic losses in Germany and may be caused by an unusual virulent FAdV-1 strain.

Reporte de Caso—Erosión de la molleja por adenovirus en pollos en Alemania.

Las infecciones por adenovirus aviar causan complejos importantes de enfermedad en pollos, pero muchos de estos virus también infectan a los pollos sin resultar en una enfermedad manifiesta. Se han reportado previamente en Japón varios brotes de erosiones en la molleja causadas por un adenovirus A del serotipo 1 (FAdV-1). Aquí se presenta un brote de erosiones en la molleja en 12 parvadas de pollos en Alemania en el 2011. Los pollos mostraron una reducción de la ganancia diaria de peso y un aumento en la tasa de mortalidad total de hasta 8%. Las aves mostraron un desprendimiento severo de la capa queratinizada y lesiones ulcerosas a necrotizantes de la mucosa subyacente. Histopatológicamente, se diagnosticó ventriculitis necrotizante con cuerpos de inclusión intranucleares basófilos en las células epiteliales. Mediante inmunohistoquímica, aislamiento viral y por el examen de microscopía electrónica se observaron partículas virales sugestivas de adenovirus en las muestras. No se pudo identificar algún agente infeccioso concurrente. Posteriormente, el virus se tipificó genéticamente como un FAdV-1 por PCR y por análisis de secuencias. El análisis filogenético de la asa L1 del hexón mostró un 100% de identidad con la secuencia con el virus CELO (chicken embryo lethal orphan). Estos hallazgos sugieren que los brotes de erosión de la molleja por adenovirus pueden ocasionar pérdidas económicas significativas en Alemania y pueden ser causados por una cepa virulenta inusual del FAdV-1.