Small interfering RNA (siRNA)-induced RNA degradation can specifically inhibit viral infection and has been extensively investigated for its efficacy as an antiviral therapeutic approach. In this study we constructed a lentivirus vector carrying a U6-short hairpin RNA expression cassette to express siRNAs in vero cells. The lentivirus vector also expressed an enhanced green fluorescence protein as a reporter. Stable siRNA-expressing cell lines were successfully established, and the inhibition efficiencies of rationally designed siRNAs targeting conserved genomic regions of the Newcastle disease virus, an important disease of poultry world wide, were assessed. Our results showed that siRNAs targeting the nucleoprotein and matrix gene potently inhibited viral replication. Our study indicates that lentivirus-mediated delivery of siRNA and the resulting gene silencing can be used to study the functions of genes in viral replication and may have a potential transgenic antiviral application in poultry.

Inhibición de la replicación del virus de la enfermedad de Newcastle por interferencia mediada ARN de lentivirus.

La degradación específica de ARN inducida por moléculas de ARN pequeñas de interferencia (siRNA) pueden inhibir la infección viral y se han investigado extensamente por su eficacia como un enfoque terapéutico antiviral. En este estudio se construyó un vector de lentivirus que contiene un casete de expresión de ARN U6 en forma de horquilla para expresar siRNAs en células Vero. El vector de lentivirus también expresaba una proteína verde fluorescente y aumentada como reportera. Se establecieron con éxito líneas celulares que expresaban de manera estable siRNA, y se evaluaron las eficiencias de inhibición de siRNAs diseñados racionalmente que estaban dirigidos a regiones genómicas conservadas del virus de la enfermedad de Newcastle, que es una enfermedad importante en avicultura a nivel mundial. Nuestros resultados mostraron que los siRNAs dirigidos a los genes de la nucleoproteína y de la matriz inhiben potentemente la replicación viral. Este estudio indica que la administración de siRNA mediada por lentivirus y el silenciamiento de genes resultante, se pueden utilizar para estudiar las funciones de los genes en la replicación viral y puede tener un potencial de aplicación transgénica antiviral en la avicultura.