Pathogenic strains of Enterococcus cecorum cause outbreaks of arthritis and osteomyelitis in chickens worldwide. Enterococcal spondylitis (ES) is a specific manifestation of E. cecorum-associated disease of broilers and broiler breeders characterized by increased flock mortality, resulting from unresolved infection of the free thoracic vertebra by pathogenic E. cecorum. A study of 22 ES outbreaks in the southeast United States revealed that pathogenic E. cecorum strains isolated from spinal lesions were genetically clonal. Here, we compare the virulence of previously genotyped pathogenic strains (n  =  8) isolated from spinal lesions and nonpathogenic strains (n  =  9) isolated from ceca of unaffected birds in a chicken embryo lethality model. Strains were inoculated into the allantoic cavity of 12-day-old broiler and specific-pathogen-free (SPF) layer embryos; embryo survival was determined by candling eggs daily for 4 days. Significantly decreased survival occurred in both broiler and SPF embryos inoculated with pathogenic genotype strains compared with embryos inoculated with nonpathogenic genotype strains (broiler embryos, 23% vs. 60%; SPF embryos, 9% vs. 61%). Embryos infected with pathogenic strains were unable to control infection and consistently showed gross changes typical of sepsis, including hemorrhage and edema. After 48 hr, similar changes were not observed in embryos infected with nonpathogenic strains. This embryo lethality assay provides a useful tool for understanding the genetic basis of E. cecorum virulence.

Ensayo de letalidad en embriones de pollo para cepas de Enterococcus cecorum patogénicas.

Las cepas patógenas de Enterococcus cecorum causan brotes de artritis y osteomielitis en pollos a nivel mundial. La espondilitis enterococócica (ES) es una manifestación específica de la enfermedad asociada con E. cecorum en pollos de engorde y en reproductoras pesadas que es caracterizada por alta mortalidad de la parvada, como resultado de la infección no resuelta en la vértebra torácica móvil causada por cepas de E. cecorum patógenas. Un estudio de 22 brotes de espondilitis enterococócica en el sureste de los Estados Unidos reveló que las cepas patógenas de E. cecorum aisladas de lesiones de la médula eran genéticamente provenientes de un clon. En este estudio, se comparó mediante un modelo de letalidad del embrión de pollo, la virulencia de las cepas patógenas previamente genotipificadas (n = 8) aisladas de lesiones de la columna vertebral y cepas no patógenas (n = 9) aisladas del ciego de las aves no afectadas. Las cepas fueron inoculadas en la cavidad alantoidea de embriones de pollo de 12 días de edad, de pollos de engorde y en aves libres de patógenos específicos (SPF); la supervivencia de los embriones se determinó por ovoscopía diariamente por cuatro días. De manera significativa se presentó una disminución en la supervivencia en ambos tipo embriones de pollos de engorde y de aves libres de patógenos específicos inoculados con cepas de genotipo patógeno en comparación con los embriones inoculados con cepas de genotipo no patógeno (embriones de pollos de engorde, 23% contra 60%; y en los embriones libres de patógenos específicos, 9% frente a 61%). Los embriones infectados con cepas patógenas fueron incapaces de controlar la infección y mostraron consistentemente cambios macroscópicos típicos de sepsis, incluyendo hemorragia y edema. Después de 48 horas, no se observaron cambios similares en los embriones infectados con cepas no patógenas. Este ensayo de letalidad del embrión proporciona una herramienta útil para la comprensión de la base genética de la virulencia de E. cecorum.